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Data download 摘要:探討了大豆脂肪酸快速氣相色譜分析方法,不需從原料中提取脂質(zhì),直接將磨碎原料中的脂質(zhì)皂化、甲脂化后, 利用色譜柱進(jìn)行氣相色譜分析。結(jié)果表明:軟脂酸、硬脂酸、油酸、亞油酸和亞麻酸的出峰時(shí)間依次為 6 57、7. 83 8. 73 & 86、9. 06 mi。這種方法的優(yōu)點(diǎn)是快速、操作方便、節(jié)省藥品;即使在較低的雜交世代樣品很少,用普 通法不易提取脂質(zhì)時(shí),此法也能順利地完成分析工作。 關(guān)鍵詞:大豆;脂肪酸;氣相色譜分析
解浸提,取上清甲酯化,采用醇鉀作為甲酯化試劑, 酯化反應(yīng)速度快并酯化*,甲酯化后離心取上清 用HP5色譜柱進(jìn)行GC分析,獲得了 一種快速檢測(cè) 大豆脂肪酸組分的氣相色譜分析法。
材料與方法
儀器和試劑
氣相色譜。 標(biāo)準(zhǔn)品:軟脂酸(> 99% )、硬脂酸(> 99% )、亞 油酸、油酸、亞麻酸(>99. 3%,購于Sgm a公 司 )。
試齊…正己烷(> 97% , AR)甲醇(
1. 2甲酯化試劑制備
取分析純氫氧化鉀2 244 g放入帶磨口的棕色 試劑瓶中,取100 mL甲醇沿玻璃棒注入試劑瓶中,
大豆油脂是由脂肪酸和甘油組成,其中脂肪酸 占油脂總量的90%以上,是油脂的主要成分。大豆 油脂的特性與其所含不飽和脂肪酸的組成與配比 有關(guān)。大豆油脂不飽和脂肪酸中所含的亞油酸 (18: 2)和亞麻酸(18: 3)是哺乳動(dòng)物自身不能合成 的,該重要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)必須從植物油脂中獲得。大 豆是亞油酸含量較高的油用作物,可防止血清中膽 固醇的增加和沉積,軟化血管,對(duì)防治高血壓和心 血管疾病均有重要作用。亞麻酸對(duì)維持細(xì)胞膜的 穩(wěn)定性和調(diào)節(jié)細(xì)胞膜適應(yīng)性具有極其重要的生物 學(xué)意義。大豆脂肪酸均采用色譜分析法測(cè)定,但不同研究者所采用的進(jìn)樣樣品前處理方法和酯化試 劑不同。前人分析大豆脂肪酸組分,通常采用索氏 抽提法或二氧化碳臨界萃取法先提取脂肪提 取脂肪要浪費(fèi)大量的時(shí)間,提取脂肪后再使用有機(jī) 溶劑溶解脂肪?,F(xiàn)對(duì)Ssana等方法進(jìn)行了改進(jìn), 將磨碎原料中的脂質(zhì)不進(jìn)行提取直接用正己烷溶
用玻璃棒攪拌3mn在室溫下反應(yīng)2 h后,待用,如 不用立即放于4。C冰箱中保存,可使用3 d。 1. 3樣品處理
稱取0 33g已粉碎的大豆樣品于L 5mL的離 心管中,加入ImL正己烷,充分振搖0. 5min室溫 放置5 I;然后將上清液移入另一只1 5 mL離心管 中,在上清離心管加入已配好的0 5mL甲酯化試 劑進(jìn)行甲酯化反應(yīng),振蕩2min在室溫下反應(yīng)1h。 移上清,在6 000 I- mil- 1離心機(jī)離心5 m in然后 上清進(jìn)樣GC分析。 14 GC分析條件
色譜柱 HP519091J-413 ( 30m x 320Um x 0. 25Um);進(jìn)樣量1UL,分流進(jìn)樣方式,分流比50: 1; 進(jìn)樣口溫度:220°C;載氣:Nq 45 mL ‘ mn ?氫氣: 40 mL‘ min-1;空氣 450mL ‘ mh- 1。程序升溫: 150°C下保持Imin然后以20°0 m if1的速率升 至200°C,保持3 min再以10°C ‘ min-1的速率升至 250。C,保持2 mi。檢測(cè)器:氫火焰離子檢測(cè)器 (FD),檢測(cè)器溫度恒溫275。C。
結(jié)果與分析
與傳統(tǒng)方法比較
運(yùn)用毛細(xì)管氣相色譜進(jìn)行分離,經(jīng)甲酯化的脂 肪酸成分,通過色譜數(shù)據(jù)工作站689Q利用峰面積 歸一化法,測(cè)得各化學(xué)組分在脂肪酸中的百分含 量。該方法快速、操作方便、節(jié)省藥品;即使在較低 的雜交世代樣品很少,用普通法不易提取脂質(zhì)時(shí), 此法也能順利地完成分析工作。